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    厭氧培養箱操作使用流程及注意事項

    厭氧培養箱操作使用流程及注意事項

    ?一、操作使用流程?

    ?準備工作?

    將設備放置在溫差小、遠離熱源且平穩的位置,連接氮氣瓶和混合氣瓶(N? 85%、H? 10%、CO? 5%),檢查氣路密封性?。

    清潔箱體內部及手套、托盤等配件,確保無污染;檢查鈀催化劑是否有效?。

    ?啟動與厭氧環境形成?

    接通電源,開啟照明燈和溫控儀,設置目標溫度(通常35–37℃)?。

    ?氣體置換流程?:

    ?第一次氮氣置換?:向操作室充入氮氣,使手套鼓起后扎緊袋口,重復三次以降低氧含量?。

    ?混合氣體置換?:通入混合氣體(N?/H?/CO?),通過流量計控制流量至10ml/min,重復2–3次確保氧濃度極低?。

    啟用鈀催化劑和除氧裝置,1小時后用美蘭指示劑檢測氧濃度(不變色表示達標)?。

    ?樣品操作與培養?

    通過緩沖室傳遞樣品:先抽真空(≥66kPa),再充入氮氣或混合氣體,重復2–3次以維持無氧狀態?。

    穿戴手套操作樣品,避免空氣進入;培養期間定期監測溫度、濕度和氧濃度?。

    ?結束操作?

    通過緩沖室取出樣品,清潔箱內殘留物,關閉電源及氣源?。

    ?二、關鍵注意事項?

    ?安全與維護?

    ?氣路檢查?:定期檢測氣瓶、管道是否漏氣,更換氣瓶時扎緊氣管防止氧氣滲入?。

    ?催化劑維護?:鈀粒需定期更換或再生,確保催化除氧效率?。

    ?密封性驗證?:操作前檢查手套、門縫密封條,抽真空后確認壓力恢復時間?。

    ?環境控制?

    箱內物品不宜過多,避免阻擋風道影響溫度均勻性;長期使用需每日檢查氧濃度?。

    滅菌時開啟紫外線燈,時間根據實驗需求設定?。

    ?設備保養?

    停止使用時,設定40℃以上運行2小時,每半小時開門10分鐘以干燥箱體?。

    定期校準溫度、氧濃度傳感器,清潔冷凝水防止傳感器誤差?。

    ?安全警示?

    操作含氫氣的混合氣體時需遠離明火,防爆防火?。

    避免放置易燃、腐蝕性物品,確保設備散熱空間充足?。

    以上流程及注意事項整合了設備安裝、環境控制、樣品操作和長期維護的關鍵步驟,需嚴格遵循以確保厭氧環境穩定性和實驗安全性

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