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    安瓿管真空冷凍干燥機操作步驟

    安瓿管真空冷凍干燥機操作步驟:

    冷凍干燥機是由制冷系統、真空系統、加熱系統、電器儀表控制系統所組成的機器。冷凍干燥機主要部件分為干燥箱、凝結器、冷凍機組、真空泵、加熱/冷卻裝置等。冷凍干燥機(以下簡稱凍干機)就是將含水物質,先凍結成固態,而后使其中的水分從固態升華成氣態,以除去水分而保存物質的方法。

    在壓縮空氣干燥過程中,其冷凍干燥是通過降低壓縮空氣溫度,使壓縮空氣中的水份析出。冷凍干燥機(凍干機)的工作原理與電冰箱一樣,壓縮空氣經過冷凍的壓縮空氣管道后,壓縮空氣溫度下降至要求的溫度,達到干燥的要求。

    操作步驟如下:
    好氧菌冷凍干燥管的制備
    1 安瓿管準備
    安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,先用2%鹽酸浸泡過夜,自來水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH中性,干燥后、貼上標簽,標上菌號及時間,加入脫脂棉塞后,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用。
    2 保護劑的選擇和準備
    保護劑種類要根據微生物類別選擇。配制保護劑時,應注意其濃度及pH值,以及滅菌方法。如血清,可用過濾滅菌;牛奶要先脫脂,用離心方法去除上層油脂,一般在100℃間歇煮沸2-3次,每次10-30分鐘,備用。
    3 凍干樣品的準備
    在最適宜的培養條件下將細胞培養至靜止期或成熟期,進行純度檢查后(參見科技部自然科技資源平臺聯合管理辦公室文件《微生物菌種純度檢測技術規程》(試行)),與保護劑混合均勻,分裝。微生物培養物濃度以細胞或孢子不少于108-1010個/ml為宜(以大腸桿菌為例,為了取得每毫升1010個活細胞菌液2毫升-2.5毫升,只需10毫升瓊脂斜面兩支)。采用較長的毛細滴管,直接滴入安瓿管底部,注意不要濺污上部管壁,每管分裝量約0.1-0.2毫升,若是球形安瓿管,裝量為半個球部。若是液體培養的微生物,應離心去除培養基,然后將培養物與保護劑混勻,再分裝于安瓿管中。分裝安瓿管時間盡量要短,在1-2小時內分裝完畢并預凍。分裝時應注意在無菌條件下操作。
    4 預凍
    一般預凍2小時以上,溫度達到-20℃到-35℃左右。
    5 冷凍干燥
    采用冷凍干燥機進行冷凍干燥。
    將冷凍后的樣品安瓿管置于冷凍干燥機的干燥箱內,開始冷凍干燥,時間一般為8-20小時。
    6 真空封口及真空檢驗
    將安瓿管頸部用強火焰拉細,然后采用真空泵抽真空,在真空條件下將安瓿管頸部加熱熔封。
    熔封后的干燥管可采用高頻電火花真空測定儀測定真空度。
    7 保藏
    安瓿管應低溫避光保藏。
    8 質量檢查
    冷凍干燥后抽取若干支安瓿管進行各項指標檢查,如存活率、生產能力、形態變異、雜菌污染等。
    厭氧菌冷凍干燥管的制備
    主要程序與需氧菌操作相同,注意保護劑的選擇和準備,保護劑使用前應在100℃的沸水中煮沸15分鐘左右,脫氣后放入冷水中急冷,除掉保護劑中的溶解氧。
    復蘇方法
    —— 先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,
    —— 將安瓿管頂部燒熱,
    —— 用無菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,頂部出現裂紋,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,
    —— 用無菌水或培養液溶解菌塊,使用無菌吸管移入新鮮培養基上,進行適溫培養。

     


    TEL:13798128437

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